Tehnika imunoabsorpcijskega testa s povezanimi encimi – v angleščini Enzyme-Linked Immuno Assay – ali test ELISA je imunološki test, ki omogoča odkrivanje ali analizo molekul v biološkem vzorcu. Zasnovala in razvila sta ga dva švedska znanstvenika, Peter Perlmann in Eva Engvall na Univerzi v Stockholmu leta 1971.

Molekule, analizirane z metodo ELISA, so na splošno beljakovine. In vrste vzorcev vključujejo tekoče biološke materiale – plazmo, serum, urin, perspirant –, medije celične kulture ali rekombinantne beljakovine – beljakovine, ki jih proizvaja celica, katere genski material je bil spremenjen z genetsko rekombinacijo – prečiščene v raztopino.

Test ELISA se uporablja predvsem v imunologiji za odkrivanje in/ali merjenje prisotnosti beljakovin, protiteles ali antigenov v vzorcu. Ta serološki test zazna zlasti protitelesa, ki jih telo proizvede kot odgovor na virusno kontaminacijo.

Uporaba protiteles za diagnostiko nalezljivih bolezni je specifična in hitra metoda. ELISA tehnika je imunoencimska tehnika, ki omogoča vizualizacijo iz biološkega vzorca reakcij med antigenom – telesom, ki ga živi organizem šteje za tujega – in protitelesom z uporabo barvne reakcije, ki jo proizvaja encimski marker – običajno alkalna fosfataza in peroksidaza – predhodno vezani na protitelo. Barvna reakcija potrjuje identifikacijo izolirane bakterije ali prisotnost želenega virusa, intenzivnost barve pa nakazuje količino antigenov ali protiteles v danem vzorcu.

Obstajajo štiri glavne vrste testov ELISA:

• ELISA direktna, omogoča odkrivanje ali merjenje protiteles. Uporablja samo primarno protitelo;
• ELISA posredna, ki se najbolj uporablja, omogoča tudi odkrivanje ali analizo protiteles. Uporablja sekundarno protitelo, ki mu daje boljšo občutljivost kot neposredna ELISA;
• ELISA na tekmovanju, omogoča doziranje antigenov. Proizveden s konkurenco za vezi, ne uporablja encima;
• ELISA "v sendviču", omogoča doziranje antigenov. Ta tehnika se pogosto uporablja v raziskavah.

Test ELISA se uporablja za:

• Poiščite in merite protitelesa v serologiji za diagnostiko nalezljivih bolezni: virologija, parazitologija, bakteriologija itd.;
• Odmerjanje beljakovin pri nizkih koncentracijah: specifični odmerki določenih plazemskih beljakovin (imunoglobulin E (IgE), feritin, proteinski hormoni itd.), tumorski markerji itd.;
• Odmerjanje majhnih molekul: steroidnih hormonov, ščitničnih hormonov, zdravil …

Test ELISA se uporablja zlasti za diagnosticiranje številnih nalezljivih bolezni:

Spolno prenosljive bolezni (SPB)

Vključno s hepatitisom, sifilisom, klamidijo in HIV. To je glavni presejalni test za AIDS, ki ga priporočajo zdravstveni organi: pokaže prisotnost protiteles proti HIV in antigena p24 šest tednov po okužbi.

Regionalne ali endemične bolezni

Rumena mrzlica, Marburg virusna bolezen (MVM), Ladengue, Lymska bolezen, Chikungunya, mrzlica Rift Valley, ebola, mrzlica Lassa itd.

Covid-19

Test ELISA, ki ga je treba izvesti več kot 2 do 3 tedne po pojavu simptomov, omogoča ugotavljanje prisotnosti protiteles proti SARS-CoV-2 v manj kot eni uri.

Virusni patogeni, ki povzročajo prenatalne okužbe

Toksoplazmoza, rdečke, citomegalovirus, herpes simpleks na primer.

Drugi primeri

Toda našel je tudi aplikacije pri odkrivanju:

• nosečnosti;
• Avtoimunske bolezni;
• Alergeni v hrani: kvantitativno določanje skupnih imunoglobulinov E (IgE) pomaga pri oceni in zdravljenju alergij;
• Hormonske motnje;
• Tumorski markerji;
• rastlinski virusi;
• In še veliko več

Kot del odkrivanja protiteles proti SARS-CoV-2, pilotna študija, ki so jo avgusta 2020 izvedli Institut Pasteur, CNRS, Inserm in Univerza v Parizu, potrjuje zanesljivost testa ELISA: oba testa ELISA sta testirala uporabo celoten protein N SARS-CoV-2 (ELISA N) ali zunajcelična domena virusne konice (S) kot tarčni antigeni. Ta tehnika bi omogočila identifikacijo protiteles v več kot 90 % primerov z zelo nizko stopnjo lažno pozitivnih rezultatov 1 %.

Testi Elisa, ki se izvajajo v analitičnih laboratorijih na zdravniški recept, stanejo približno 10 evrov in jih 100 % povrne zdravstveno zavarovanje.

Izvajajo se v brezplačnih informacijskih, presejalnih in diagnostičnih centrih (CeGIDD) in so lahko brezplačni za HIV in SARS-CoV-2.